浅谈液相色谱仪应用方案的建立方法

浅谈液相色谱仪应用方案的建立方法
液相色谱仪检测的灵敏性较高，被广泛运用于食品、医药等领域，其主要检测项目是食品和药物工业生产过程中的药品残留，减少对人体的伤害。相关检测、科研部门在建立药品中特定物质检测或含量测定的应用方案时，须按照药典收载的相关药品分析方法的质量标准进行。建立完整的液相色谱仪检测方案需涵盖检测仪器、检测试剂、样品的制备、液相色谱仪检测条件、检测结果以及结果分析方法。
在建立方法时，选择仪器配置以及试剂应当注意以下事项：①液相色谱柱填料首选十八烷基键合硅胶；②检测器首选uv检测器；ƒ流动相首选甲醇-水系统，应尽可能少用含有缓冲液的流动相，如为碱性药物，流动相的ph值应为7~8；如为酸性药物，流动相的ph值应为3~4；④内标物应首选易得到的纯度较高的化学试剂或对照品，应与待测物质化学结构相似，理化性质接近，峰的响应值相当，以及分离度应大于1.5。
待检测样品溶液的配置可直接由样品原料经搅碎、溶解、过滤、提取而来，提取出来的样品溶剂必须经过氮吹仪结晶提纯处理后，再经溶剂过滤器过滤方可进入仪器进行检测分析。
检测过程中，须按照色谱检测条件操作，且要精准控制液相色谱仪各部件的试验状况，包括进样器、泵的压力调整，流动相的流速控制，色谱柱温箱、检测器、进样口的温度控制等都须严格执行。任何检测条件的异动都会影响到检测结果的准确性。
    检测结果的分析，即对检测样品的定性定量分析，需注意以下事项：若杂质峰的响应值与主成分峰的响应值相差太大，应首选自身对照法，而不宜选用面积归一化法；若以内标法测定含量，应考虑内标物是否含有干扰供试品的杂质；如以外标法测定含量，对照品与供试品应各取样2份，对照溶液各进样3次，供试品溶液各进样2次，计算相对标准差（rsd应不得大于l.5％）。
    最后，应进行最低检出量试验，并对同一样品分析结果的重现程度、方法的可行性，并作出评价。

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